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重组水蛭素的聚乙二醇修饰 李雪芹，候蓓蓓，赵军，田明玉，修志龙* 大连理工大学环境与生命学院 大连 116024 摘要：目的 水蛭素因血浆半衰期短而严重限制了其临床应用，聚乙二醇修饰能有效地延长其半衰期。本文通过比拟不同修饰位点、修饰方法所得单修饰产物的比率、纯度及其活性保存率，从而得到修饰专一性强且活性保存率较高的修饰策略。方法采用液相和固相修饰方法,用琥珀酰亚胺活化的PEG 20kDa 分别在 pH6.0、8.0 的条件下对水蛭素的 His 和 Lys 进行定点修饰；用SDS-PAGE 分析产物的修饰度，并用离子交换柱对修饰后的产物进行别离，然后用凝血酶滴定法测定水蛭素单修饰产物的体外抗凝活性。另外用分子动力学模拟方法预测了 pH8.0 条件下 PEG 修饰的位点。结果 在 pH6.0、8.0 的条件下，水蛭素单修饰率都高达 90%以上，但二者的单修饰活性保存率相差较大。在 pH6.0 时，液、固相单修饰活性保存率为 34%、34.8%；而在 pH8.0 时分别为 55%、96%。结论 在pH8.
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